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小科普|实验病理学技术—脱水、透明、浸蜡、包埋篇

2021-11-05


同学们,上次聊到实验病理组织的固定。接下来让我们一口气说说脱水、透明、浸蜡、包埋


脱 水


组织在固定之后内部仍含有大量水分,石蜡作为最后的包埋介质,而水不能与石蜡相互混合。所以先要利用乙醇作为脱水剂,将水从组织中完全置换出来。但是乙醇对组织有明显收缩作用,所以必须采用从高浓度到低浓度逐级升高的梯度乙醇来脱水。


透 明


脱水完毕的组织块,常用二甲苯作为能与乙醇融合同时又能溶解石蜡的媒介剂,将乙醇从组织中置换出来,达到石蜡浸入组织的最终目的。此过程中,媒介剂进入组织内其光折射指数接近于细胞蛋白的折光指数,使整个组织变得透亮,此过程称为透明。


浸 蜡


组织经过脱水透明后,要在熔化的石蜡包埋剂里面浸渍,称为浸蜡。一般需经过2-3次浸蜡过程才能完成。


包 埋


浸蜡后的组织块和熔化石蜡固定称为均一硬度易于切片的过程,即为包埋。


注意事项

1.脱水、透明、浸蜡、包埋中所有试剂需要记录使用次数和脱水组织块数量,定期更换;

2.不同脏器组织脱水程序会有所不同,需经实验摸索得到适合的脱水程序;

3.组织与包埋盒底部要贴平,使组织与蜡之间不留空隙;

4.包埋时候应注意包埋方向。一般肝、肾、肿瘤等选择组织最大面进行包埋,但是对于一些需要分别观察横截面和纵截面的组织,需事先确定好观察方向。


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